GSH-420 Assay Kit

Metoda je založena na tvorbě chromoforového thionu. Absorbance měřená při 420 nm je přímo úměrná koncentraci GSH. Reakce probíhá ve třech krocích. Nejprve se vzorek pufruje a přidá se redukční činidlo, tris(2-karboxyethyl)fosfin (TCEP), aby se oxidovaný glutathion (GSSG) redukoval na redukovaný stav (GSH). Přidá se chromogen, 4-chlor-1-methyl-7-trifluormethylchinolinium methylsulfát, který tvoří thioethery se všemi thioly přítomnými ve vzorku. Po přidání zásady ke zvýšení pH nad 13 dochází k b‍-‍eliminaci specifické pro GSH‍-‍thioether, což vede k tvorbě chromoforického thionu.